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操作蛋白層析柱需要按照正確的流程步驟來(lái)進(jìn)行

更新時(shí)間:2020-06-24瀏覽:1988次

 蛋白層析柱在蛋白,多肽,抗體等等行業(yè)中占據(jù)了不容忽視的地位,廣泛應(yīng)用于制備分離的各類化合物。且種類齊全的填料以及柱管會(huì)為分離柱提供更良好的性能展示平臺(tái),極大地滿足了廣大客戶實(shí)際應(yīng)用的需要。

 
蛋白層析柱操作流程一般為:預(yù)處理、逆流洗柱、水洗、吸附、解吸和再生
1. 預(yù)處理:在吸附樹(shù)脂的生產(chǎn)過(guò)程中,一般采用的是工業(yè)級(jí)原料,產(chǎn)品沒(méi)有經(jīng)過(guò)進(jìn)一步純化處理,樹(shù)脂內(nèi)部殘留少量單體,所以在使用之前,需用水溶性溶劑對(duì)其浸泡處理,然后用去離子水通過(guò)樹(shù)脂層,置換出水溶性溶劑離子方可投入使用。
2. 逆流洗柱:用水洗出去水離子及破碎填料,樹(shù)脂裝入后,用蒸餾水反洗樹(shù)脂層,直至出水清晰、無(wú)氣味、無(wú)細(xì)碎樹(shù)脂為止。再依次用酸堿等浸泡、沖洗樹(shù)脂層,至出水呈中性為止。
3. 水洗:水洗的主要目的是除去蛋白層析柱上所附著的渣滓。
4. 吸附:吸附操作自上而下(或自下而上)通液,可采用不同流速,以選取適宜條件。流出液每隔一段時(shí)間取樣檢測(cè),達(dá)泄漏點(diǎn)停止吸附,或多柱串聯(lián)達(dá)飽和后解吸。吸附主要是吸取料液中的渣滓或要回收物,該過(guò)程應(yīng)控制料液的速度及吸附量,大孔樹(shù)脂應(yīng)*浸泡在料液里,以提高吸附效果和運(yùn)行穩(wěn)定性。
5. 解吸和再生:解吸操作自上而下(或自下而上)通解吸劑,單柱吸附時(shí),解吸與吸附操作對(duì)流為佳。解吸劑沸點(diǎn)要低以便回收處理。

 

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